[Новые сообщения· Участники· Правила форума· Поиск· RSS]
  • Страница 1 из 1
  • 1
26) Методы, применяемые в генетическом анализе у бактерий и
EvGaDeAdДата: Понедельник, 2012-01-16, 6:08 PM | Сообщение # 1
СОЗДАЁТ ГРУППУ
Группа: КРУТЫЕ АДМИНЫ
Сообщений: 407
Репутация: 0
Статус: Offline
До 40-х гг. 20 в. считалось, что, поскольку у микроорганизмов нет ядерного аппарата и мейоза, на них не распространяются законы Менделя и хромосомная теория наследственности. С начала 40-х гг. микроорганизмы становятся объектом интенсивных генетических исследований. Именно на них были решены многие кардинальные вопросы современной генетики. Так, первое указание на то, что материальным носителем наследственности служит дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК), было получено в опытах на пневмококках. Генетические исследования микроорганизмов особенно интенсивно стали развиваться после того, как американские генетики С. Лурия и М. Дельбрюк показали на кишечной палочке (Escherichia coli), что и бактерии подчиняются мутационным закономерностям. Ранее существовавшее представление об адекватной, адаптивной изменчивости у бактерий возникло вследствие методической ошибки, заключавшейся в изучении культуры как единицы изменчивости. Был предложен новый принцип изучения изменчивости у бактерий - клональный анализ, т. е. изучение потомства одной клетки - родоначальницы клона. Клональный анализ - м. исследования клеточных взаимодействий в процессе индивидуального развития путем формирования генетических мозаиков (изменение какой-то части организма, развивающейся из мутантной клетки.). Др.опред-е -- изучение потомства одной клетки - родоначальницы клона. Важной вехой в развитии генетики микроорганизмов явился разработанный американскими генетиками Дж. и Э. Ледербергами метод реплик, или отпечатков, позволивший доказать, что мутации возникают у бактерий независимо от условий культивирования, и, кроме того, значительно упростивший приёмы отбора вариантов микроорганизмов с желаемыми свойствами. Метод отпечатков-м. оперативного выявления биохимических мутаций у микроорганизмов; предложен Дж.Ледербергом в 1952, его суть состоит в “перепечатывании” бархатной “печаткой” колоний микроорганизма (в оригинале метода - E.coli), выросших на нормальной среде, в чашки Петри со средой, содержащей селективный агент, например, стрептомицин, - частота мутаций устойчивости к стрептомицину определяется по числу выросших “перепечатанных” колоний. Метод селективных сред С. Н. Виноградский вместо агара или желатины применил гель кремниевой кислоты, иначе говоря, затвердевший силикатный клей с добавками Сахаров и солей, но без азота. Поэтому любая колония, выросшая на такой среде, автоматически оказывалась азот-фиксирующей: ведь необходимый для жизни азот она могла получить только из воздуха.М. сел. сред оказался очень эффективным. Дана задача: из многих миллиардов клеток «дикой», автотрофной бактерии отобрать те, которые потеряли способность синтезировать нез. а/к гистидин. С этой целью культуру бактерий выращивают в жид. ср. без гистидина, но с выс. концентрацией антибиотика пенициллина. Те клетки, которым гистидин не нужен, начинают расти: тут же оболочки их лопаются и бактерии погибают. Ведь пенициллин останавливает рост их оболочек, и увеличивающаяся в объеме цитоплазма разрывает кл.Нуждающиеся в гистидине ауксотрофы остаются живы — они без него не растут. Остается осадить культуру в центрифуге, отмыть от пениц. чистой средой и пересеять на твердую ср., содер. гистидин. Таким способом можно отобрать одну нужную бактерию из сотен миллионов и за сутки получить от нее многомиллионное потомство.
 
  • Страница 1 из 1
  • 1
Поиск:

Copyright MyCorp © 2007